洁净室的清洁与消毒要点及要求

在医疗保健和生物制药行业，厂房设施的微生物水平必须保持在受控状态。有很多方法可以实现这个目的，包括空调系统（HVAC）的运行，物料的控制，正确的着装和经过培训的人员，以及通过使用规定的清洁技术包括清洁剂和消毒剂的应用。

清洁和消毒的目的是为了保证洁净室能在一个合适的时间周期内达到规定的微生物洁净水平要求。因此，洁净室的清洁与消毒是污染控制中一个很重要的部分。以下列出八个涉及到清洁和消毒的重要步骤，旨在保证洁净室的“洁净”。

1正确理解清洁和消毒

清洁和消毒是两个不同的概念，有时候人们会混淆这两个概念。清洁，最主要的是使用清洁剂并在消毒之前进行。清洁剂是表面清洁，就是把表面的“油污”（例如灰尘和油脂）除去。油污去除是进行消毒之前很重要的一个步骤，因为表面油污残留越多，消毒的效果就会越差。

清洁剂一般是穿透油污降低表面强度（油污依附在表面），以达到清除的效果（粗略地说，清洁剂增加了水的清洗能力）。

消毒是采用化学杀菌方式，能杀灭大量的微生物繁殖体（另外，一些消毒剂是杀孢子剂）。

2选择最适合的清洁剂和消毒剂

选择最合适的清洁剂和消毒剂是很重要的。洁净室的管理人员要确保清洁剂和消毒剂的效果以及为不同类型的洁净室选择合适的清洁剂和消毒剂。需要注意的是有些清洁剂和消毒剂不能混合使用。

在选择清洁剂的过程中，以下几点很重要：

a) 清洁剂应是中性、非离子型的。

b) 清洁剂应该是不起泡沫的。

c) 清洁剂应该和消毒剂相匹配（即清洁剂的残留不会削弱消毒剂的效果）。

在选择消毒剂的过程中，要考虑以下几点：

a) 为了满足GMP法规的要求，两种消毒剂应轮换使用。虽然监管部门要求使用两种不同的消毒剂，但是，科学地说，这是没有必要的。针对这一点，应选择两种有不同效果的消毒剂。明智的选择是，其中要有一种能杀死细菌孢子的消毒剂。

b) 消毒剂应该具有广谱消毒作用（范围广），即消毒剂能有效的杀灭很多种类的微生物繁殖体，其中包括革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌。

c) 理论上，消毒剂应该很迅速的起作用（作用快）。消毒的速度取决于消毒剂杀死一个微生物群所需要的接触时间。接触时间就是使用消毒剂的表面必须保持湿润的时间。

d) 有机物的残留和清洁剂的残留不能影响消毒剂的效果。

e) 更高级别的洁净室（例如ISO 14644 的5和7级）必须采用无菌的或者经洁净室操作人员灭菌后的消毒剂。

f) 消毒剂应能够在洁净室运行温度条件下使用。如果这个洁净室是冷藏室，那么就要检查消毒剂能不能在这个温度下起作用。

g) 消毒剂不能损伤被消毒的材料，如果会发生损伤，就要采取措施避免损伤的发生。很多能杀死细菌孢子的消毒剂都是含氯的，使用后若不及时擦除残留物，就会损伤材料，例如不锈钢材料。

h) 消毒剂应对操作人员无害并符合当地健康安全法的标准。

i) 消毒剂应该经济实惠且要便于稀释并装入符合要求的容器，例如手动式喷雾壶。

3理解不同种类的消毒剂

消毒剂有很多不同的种类，适用于不同的消毒形式，针对于微生物有不同的消毒效果。消毒剂作用于微生物细胞时包括以下几个不同的方式，作用于细胞壁，细胞质薄膜（即磷脂和酶提供各种消化目标的地方）或者细胞浆。在杀细菌孢子和非杀细菌孢子（区分非氧化性和氧化性化学物质）的消毒剂之间做选择时，理解不同种类消毒剂之间的区别就显得尤为重要。

非氧化性消毒剂包括酒精，醛，两性表面活性剂，双胍，酚和季铵化合物。氧化性消毒剂包括卤素和氧化剂，例如过氧乙酸和二氧化氯。

4验证消毒剂

用于制药厂房的消毒剂必须经过验证。验证包括实验室测试并使用美国AOAC标准或欧洲标准。有些测试可以由消毒剂的制造商实施，但是有些测试必须在药厂的厂房内进行。

消毒剂验证包括挑战性测试，即挑战不同浓度的消毒剂溶液（作为悬浮液测试），挑战不同材质的被消毒表面，以及挑战不同微生物的消毒效果，包括从厂房内分离的微生物的测试。

5影响消毒剂效果的因素

在实际情况中，有很多因素会影响消毒剂的消毒效果。为了确保消毒活动的成功，能够了解这些因素是很重要的。影响消毒剂效果的因素包括：

a) 浓度：正是浓度的选择保证了最大程度上的微生物杀死率。消毒剂浓度越大杀死细菌越多是一个谬论。因为消毒剂只在合适的浓度起作用。

b) 时间：消毒剂使用的时间很重要。消毒剂与微生物结合，穿过细胞壁，并达到消毒的具体目标部位，消毒剂这个特定的工作模式需要足够的时间。

c) 微生物的数量和种类。对于某些特定的的微生物繁殖体，消毒剂的消毒效果不明显。一大群独立的微生物芽孢聚集在一起，不具有杀死细菌芽胞的消毒剂就失去了作用。

d) 温度和pH值：每一种消毒剂都有一个最有效的pH值和温度范围。如果温度和pH值不在这个范围之内，消毒剂的消毒效果就会受到影响。

6清洁材料

实施消毒和清洁时所使用是材料必须合适，能够将每一种清洁剂和消毒剂均匀涂成薄层。用于无菌生产区域的地板，设备表面和墙壁的清洁剂和消毒剂，这些材料必须是经过洁净室认证，并无颗粒脱落（如无纺布、不起毛的绒布）。

7清洁技术

清洁消毒方法很重要。如果清洁剂和消毒剂没有正确使用，就不能有效地清洁区域表面，由于消毒剂不能穿过表面油污层，那么厂房内就会保持过高的微生物污染水平。

规定的清洗和消毒步骤必须到位，例如：

清扫灰尘和碎屑（如适用）

使用清洁剂溶液进行擦拭

确保清洁剂已干

使用消毒剂溶液进行擦拭

保持接触表面面湿润，保证足够接触时间

使用注射用水或70%IPA（异丙醇）进行擦拭，清除消毒剂的残留

8监控清洁和消毒的有效性

用以评估清洁和消毒的有效性的方法主要是通过洁净室环境监测结果。通过触碟和棉签对表面进行微生物取样来进行评估。如果得到的结果不在规定的行动限或公司内控标准限度内，那就可能以下几个方面出了问题：清洁剂和消毒剂、清洁的频率或者清洁的方法。相反，如果结果是符合标准的，那么洁净室的管理人员就能自信的说，洁净室是真正的“洁净”。

总结

以上所列的就是使用清洁剂和消毒剂保持洁净室洁净的八个步骤。建议最好将上述提到的步骤整合到SOP中，并对操作和管理人员进行培训。一旦厂房设施经过验证并处于受控状态，最重要的事情就是使用正确的方法或技术以及合适的清洁剂和消毒剂，并在规定的周期内对厂房进行持续清洁和消毒。这样，洁净室就能保持洁净。